Alterações ultraestruturais em larvas de Aedes aegypti submetidas ao diterpeno labdano, isolado de Copaifera reticulata (Leguminosae), e à uma fração rica em taninos de Magonia pubescens (Sapindaceae) / Ultrastructural alterations in larvae of Aedes aegypti subject to labdane diterpene isolated from Copaifera reticulata (Leguminosae) and a fraction enriched with tannins of Magonia pubescens (Sapindaceae)

INTRODUÇÃO: Dengue é um importante problema de saúde pública, em vários países, e tem como principal vetor o Aedes aegypti, mosquito mais adaptado às áreas urbanizadas. Apresenta-se, pela primeira vez, as alterações ultraestruturais em larvas de 3º estádio, desse mosquito, causadas pelos larvicidas naturais, um diterpeno labdano, extraído de Copaifera reticulata, e uma fração rica em taninos catéquicos, extraída de Magonia pubescens, evidenciando o mecanismo de ação dessas substâncias. MÉTODOS: Os experimentos foram realizados com larvas de 3º estádio em solução de 0,9ppm, do diterpeno (3-β-acetoxylabdan-8(17)-13-dien-15-óico) e de 3,7ppm, da fração majoritária de tanino catéquico de massa molecular 864Da. Obtiveram-se as substâncias através de fracionamentos cromatográficos sucessivos, identificadas por ressonância magnética nuclear de hidrogênio e espectrometria de massas. As larvas que atingiram estado letárgico foram coletadas e dissecadas e seus tubos digestórios fixados, desidratados, emblocados e polimerizados. Cortes ultrafinos foram feitos e contrastados com acetato de uranila 3 por cento e citrato de chumbo, posteriormente, levados ao microscópio eletrônico. RESULTADOS: As principais alterações ultraestruturais provocadas pelos diterpeno e tanino sobre larvas de Aedes aegypti foram vacuolização citoplasmática, desorganização e degeneração celular, mudança estrutural dos microvilos e deslocamento das células da lâmina basal. CONCLUSÕES: O diterpeno e a fração rica em taninos catéquicos provocaram a morte das larvas de Aedes aegypti através da destruição celular no intestino médio.

INTRODUCTION: Dengue is an important public health problem in many countries and its main vector Aedes aegypti, is the mosquito most adapted to urban areas. For the first time, the mechanism of action of labdane diterpenoid extracted from Copaifera reticulata and the fraction enriched of catechin tannins extracted from Magonia pubescens is demonstrated through ultrastructural alterations of Aedes aegypti larvae. METHODS: Experiments were performed using a 0.9ppm solution of diterpenoid and 3.7ppm of the fraction as the main catechin tannin of molecular mass 846Da. The compounds were obtained by thin layer chromatography and identified by nuclear magnetic resonance of hydrogen and mass spectrometry. Larvae that achieved lethargic state were collected and dissected. Next, they were contrasted with 1 percent uranyl acetate, dehydrated, embedded and polymerized. Ultrathin sections were made, mixed with 3 percent uranyl acetate and lead citrate and placed in an electron microscope. RESULTS: The main ultrastructural alterations caused by the diterpenoid and by tanins in larvae of Aedes aegypti were: cytoplasmic vacuolation, alteration of microvilli, cellular aging, cell disruption and degeneration, formation of secretion vesicles and structural changes in microvilli, irregular nuclei and displacement of cells in the basal lamina. CONCLUSIONS: The fraction containing tannins and the diterpenoid caused the death of Aedes aegypti larvae by cell destruction in the midgut.

Alterações morfo-histológicas em larvas de Aedes aegypti (linnaeus, 1762) (Diptera, Culicidae) causadas pelo tanino catéquico isolado da planta do cerrado magonia pubescens (Sapindaceae) / Changes in morphohistologic larvae of aedes aegypti (Linnaeus, 1762) (Diptera, Culicidae) caused by tannins catechin isolated from the plant magonia pubescens (Sapindaceae)

O controle do Aedes aegypti é hoje um dos grandes problemas de saúde pública no Brasil, por ser o principal vetor do dengue e da febre amarela urbana. De origem africana, este mosquito adaptou-se muito bem às condições climáticas brasileiras e se encontra distribuído em todos os estados. Os métodos usuais de combate e controle deste mosquito têm sofrido vários questionamentos. Os inseticidas químicos atualmente utilizados têm levado ao surgimento de populações resistentes de mosquitos, a consequente elevação de sua densidade já desencadeou grandes epidemias de dengue. Substâncias inseticidas de origem botânica podem ser candidatas alternativas ao controle. Este trabalho apresenta, pela primeira vez, as alterações morfo-histológicas causadas pela atividade larvicida do tanino catéquico, extraído de Magonia pubescens, nas larvas de A. aegypti, mostrando o potencial larvicida deste composto natural. Larvas de terceiro estádio foram submetidas aotanino catéquico, a 37ppm, solubilizado em água, onde permaneceram por até 24 horas. As larvas que atingiram estado letárgico foram coletadas e fixadas em paraformaldeído a 4por cento em tampão cacodilato de sódio 0.1M pH 7.2, incluídas em resina, montadas em lâminas, coradas pelahematoxilina-eosina e analisadas por microscopia de luz. Os principais efeitos tóxicos celulares do tanino catéquico sobre larvas de A. aegypti foram: elevada vacuolização e ausência dos limites citoplasmáticos, formação vesicular apical com liberação de conteúdo citoplasmático, aumento do espaço intercelular e desprendimento de células da membrana basal.

Evaluation of activity of the crude ethanolic extract of Magonia pubescens St. Hil (Sapindaceae) against larvae of the cattle tick Rhipicephalus (Boophilus) microplus (Canestrini, 1887) (Acari: Ixodidae)

The acaricidal potential of the crude ethanolic extract (c.e.e.) of the stem peel of Magonia pubescens was evaluated against larvae of Rhipicephalus (Boophilus) microplus. The larvae were placed in filter paper envelopes impregnated with different concentrations of c.e.e., dissolved in dimethylsulfoxide (DMSO) and distilled water for determination of lethal concentrations (LC). The following treatments were used: 1. Envelopes of dry filter paper; 2. Envelopes of filter paper moistened with distilled water; 3. Envelopes of filter paper moistened with a solution of DMSO in distilled water; and 4. Envelopes moistened with 2 mL of each concentration of the c.e.e. to be tested. The bioassays were carried out in quadruplicate at 27°±1° C and RH e"80 percent and 12h light. Mortality was observed after 48 h, LC50 and LC99 values of 365 and 4,000 ppm being obtained. There was no significant mortality in larvae exposed to the first three treatments (p < 0.05).

Este trabalho objetivou avaliar o potencial acaricida do extrato-bruto etanólico (e.b.e.) da casca do caule de Magonia pubescens sobre larvas do carrapato bovino Rhipicephalus (Boophilus) microplus. As larvas foram acondicionadas em B.O.D. climatizada, em envelopes de papel filtro impregnados com diferentes concentrações do e.b.e., solubilizado com dimetilsulfóxido (DMSO) e água destilada, para determinação das Concentrações Letais (CL). Foram realizados os seguintes tratamentos: 1. envelopes de papel filtro seco; 2. envelopes de papel filtro umedecidos com água destilada; 3. envelopes de papel filtro umedecidos com solução de DMSO e água destilada; e 4. envelopes umedecidos com 2 mL de cada concentração do e.b.e. testada. Os bioensaios foram feitos em quadruplicata, em uma câmara climatizada a 27°±1° C, URe"80 por cento e fotofase natural de 12 horas. A mortalidade foi observada após 48h. Obtiveram-se as CL50 de 365 e CL99 de 4.000 ppm. Não houve mortalidade significativa para os três primeiros tratamentos (p<0,05).